Spektrofotometr i spektrofluorymetr – zasada działania

Spektrofotometr UV-Vis
Skan 800 → 400 nm. Instrument rejestruje A(λ)=−log₁₀(I/I₀), widmo rysuje się punkt po punkcie (nm po nm).

Status: Start
Źródło Monochromator Kuwetka Detektor D2 + halogen siatka (obrót = zmiana λ) λ = 800 nm pusta Sygnał: — próbkowanie nm po nm
1) Kliknij Lampa ON.
Widmo A(λ) punktowo
400 450 500 550 600 650 700 750 800 Długość fali λ (nm) A 0.0 0.4 0.8 1.2 1.6
Maksimum: —
Po kliknięciu „Zarejestruj blank” zobaczysz “widmo” A(λ)=0 rysowane punktowo.

Spektrofluorymetr
Wpisz maksimum absorpcji związku oraz ustawioną długość fali wzbudzenia (EX). Im lepsze pokrycie, tym silniejsza fluorescencja.

λabs,max (nm)
Ustawione λEX (nm)
Stokes shift Δλ (nm)
Status: Start Siła FL:
LAMPA PRÓBKA DETEKTOR D2 + halogen brak próbki Sygnał: — PMT / diody 90° siatka EX siatka EM λEM = — nm λEX = —
1) Kliknij Lampa ON, potem ustaw λEX tak, żeby pokrywało się z λabs,max.
Widmo: Abs (szare, przerywane) + FL (czarne) (jedno okno)
800 750 700 650 600 550 500 450 400 Długość fali λ (nm)
Maksimum emisji: —
Zasada: jeśli λEX ≈ λabs,max → silna fluorescencja; jeśli się różnią → widmo ~0 (ale nadal rejestrowane).